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熒光標記氧化型低密度脂蛋白制備工作如何進行綠色化？

更新時間：2024-08-19 點擊次數：580

　　熒光標記氧化型低密度脂蛋白是血漿中的主要膽固醇運輸顆粒，其在某些條件下被氧化修飾后形成的Ox-LDL在動脈粥樣硬化等心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。為了研究LDL在病理和生理過程中的作用能運用，科學家們開發(fā)了多種標記方法，以便在細胞和分子層面進行追蹤參與水平。

　　首先講理論，LDL的提取是制備的第一步。從人血漿中分離出來的LDL通過一系列的離心和沉淀步驟得到純化具體而言。得到的LDL需要在含10μMCuSO4的PBS溶液中進行氧化反應最為顯著。銅離子作為氧化催化劑，推動脂質過氧化反應的進行奮戰不懈。此過程中生產能力，LDL中的多不飽和脂肪酸（PUFAs）被氧化，形成一系列復雜的氧化產物規定，包括丙二醛（MDA）和4-羥烯酸（4-HNE）可持續。這些物質進一步與ApoB-100結合，形成希夫氏堿示範推廣，從而改變LDL的結構和功能特性情況。

　　接下來是進行熒光標記。常用的熒光標記物為DiI大大縮短，這種標記物可以與LDL顆粒結合堅持好，不影響其生化特性開放要求。將DiI與已氧化的LDL孵育，通過疏水作用使DiI嵌入LDL顆粒的脂質核心中構建。經過適當的孵育時間后緊密相關，未結合的DiI通過透析或凝膠過濾去除，最終獲得熒光標記的氧化型低密度脂蛋白應用前景，即DiI-Ox-LDL指導。

　　最后是熒光標記氧化型低密度脂蛋白的注意事項與應用領域。在整個過程中兩個角度入手，需要嚴格控制實驗條件關註點，如溫度、pH值和反應時間進入當下，以確保熒光探針的有效結合并且保持Ox-LDL的生物活性建強保護。制備后的DiI-Ox-LDL通常在4℃避光保存，且不可凍結首次。該標記脂蛋白廣泛用于研究脂質代謝增持能力、受體介導的內吞作用以及動脈粥樣硬化機制。

熒光標記氧化型低密度脂蛋白

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